1、来源于无饲养层培养诱导多能干细胞的牙周韧带干细胞样细胞的建立
牙周韧带 （PDL） 是一种纤维结缔组织，将牙根的牙骨质连接到牙槽骨。PDL 中包含的 PDL 干细胞 （PDLSCs） 可以分化为牙骨质母细胞、成骨细胞和 PDL 成纤维细胞，在牙周组织再生中起重要作用。因此，预计 PDLSCs 可用于牙周组织再生治疗。在之前的一项研究中，我们将诱导多能干细胞 （iPSC） 分化为 PDLSC 样细胞 （iPDLSCs），这些细胞表达 PDL 相关标志物和间充质干细胞 （MSC） 标志物;它们还表现出高增殖和多能性。然而，这种分化方法中使用的 iPSC 是在小鼠胚胎成纤维细胞上培养的;因此，它们构成了饲养层 iPSC （OF-iPSC）。考虑到饲养细胞衍生成分污染的风险，与 OF-iPSC （即 OF-iPDLSCs） 不同的 iPDLSCs 不适合临床应用。在这项研究中，我们旨在使用 OF-iPDLSC 分化方法从无饲养层 iPSC （FF-iPSC） 中获得 PDLSC 样细胞。首先，我们将 FF-iPSCs 分化为神经嵴细胞样细胞 （FF-iNCCs），并证实 FF-iNCCs 表达 NCC 标志物 （例如，Nestin 和 p75NTR）。然后，我们在人原代 PDL 细胞衍生的细胞外基质上培养 FF-iNCCs 2 周;所得细胞被命名为 FF-iPDLSCs。与 OF-iPDLSCs 相比，FF-iPDLSCs 表现出更高的 PDL 相关和 MSC 标志物表达。FF-iPDLSCs 在体外也表现出增殖和多能性。最后，我们分析了 FF-iPDLSCs 在用 β-磷酸三钙支架皮下移植到免疫缺陷小鼠的背组织中后在体内形成牙周组织的能力。移植后 8 周，FF-iPDLSCs 已形成骨钙素阳性骨/牙骨质样组织和胶原 1 阳性 PDL 样纤维。这些结果表明，我们成功地从 FF-iPSCs 获得了 PDLSC 样细胞。我们的研究结果将有助于开发新型牙周再生疗法。
